Đối với các hoạt động tình dục đồng tính nữ, quan hệ tình dục qua đường hậu môn bao gồm quan hệ xâm nhập bằng ngón tay, sử dụng dương vật giả hoặc đồ chơi tình dục khác, hoặc liếm hậu môn.[11][70]

Có ít nghiên cứu về hoạt động tình dục qua đường hậu môn ở những phụ nữ có quan hệ tình dục đồng giới so với các cặp có xu hướng tình dục khác. Năm 1987, một nghiên cứu phi khoa học (Munson) được thực hiện trên 100 thành viên của một tổ chức xã hội đồng tính nữ ở Colorado. Khi được hỏi họ đã sử dụng kỹ thuật nào trong 10 lần quan hệ tình dục gần đây nhất, những người đồng tính nữ ở độ tuổi 30 có khả năng sẽ thực hiện kích thích hậu môn (bằng ngón tay hoặc dương vật giả) cao gấp đôi các nhóm tuổi khác.[3] Một nghiên cứu năm 2014 về phụ nữ đồng tính nữ ở Canada và Hoa Kỳ đã phát hiện ra rằng 7% tham gia vào việc kích thích hoặc thâm nhập hậu môn ít nhất một lần một tuần; khoảng 10% đã làm như vậy hằng tháng và 70% thì không làm bao giờ.[71] Liếm hậu môn cũng ít được thực hành hơn trong các cặp đồng tính nữ.[72][73]